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大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒實驗原理
BS-3416大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒
大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒采用?雙抗體夾心法?(Sandwich ELISA)檢測樣本中的gp130濃度，其核心原理是通過特異性抗體的雙重識別實現抗原的捕獲與信號放大，最終通過顯色反應定量分析?。
1. ?固相抗體包被?
將抗gp130的捕獲抗體(通常為多克隆抗體)預包被于微孔板表面，形成固相載體?。
2. ?抗原結合與洗滌?
樣本或標準品中的gp130與固相抗體特異性結合，洗滌去除未結合物質，減少背景干擾?。
3. ?酶標抗體結合?
加入生物素化的檢測抗體(通常為單克隆抗體)，與gp130的另一表位結合，形成“抗體-抗原-酶標抗體"夾心復合物?。
4. ?信號放大與顯色?
生物素-親和素系統?：部分試劑盒引入鏈霉親和素-過氧化物酶(SABC)復合物，與生物素化的檢測抗體結合，進一步放大信號?。
酶催化顯色?：加入底物(如TMB)，辣根過氧化物酶(HRP)催化TMB顯藍色，終止液(如硫酸)終止反應后變黃色，顯色強度與gp130濃度成正比?。
5. ?定量分析?
通過酶標儀在450 nm波長測定吸光度(OD值)，繪制標準曲線計算樣本中gp130濃度?。
技術特點與優化
高特異性?：雙抗體識別不同表位，避免交叉反應?。
靈敏度高?：檢測范圍通常為3.12–200 ng/mL或更低(如pg/mL級)?。
樣本兼容性?：適用于血清、血漿、組織勻漿等?。
常見問題與解決方案
高背景?：優化封閉步驟(如使用BSA)或增加洗滌次數?。
顯色異常?：檢查底物孵育時間或酶標抗體活性?。
應用場景
gp130作為IL-6家族細胞因子的共同信號受體，其檢測在免疫調控、炎癥研究及腫瘤標志物分析中具有重要價值?。
注：以上資料供參考，不作為實驗依據，如需具體產品說明請咨詢技術老師或品牌供應商。
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