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人層粘連蛋白α3(lama3)ELISA試劑盒實驗使用說明書
BS-9911人層粘連蛋白α3(lama3)elisa試劑盒
以下是為您整理的人層粘連蛋白α3(LAMA3)ELISA試劑盒實驗使用說明書核心內(nèi)容：
一、實驗原理?
采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA)。預(yù)包被抗LAMA3抗體的微孔板中依次加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品及HRP標(biāo)記檢測抗體，形成抗體-抗原-抗體復(fù)合物。TMB顯色后，450nm波長測定吸光度，濃度與OD值呈正相關(guān)?。
二、試劑盒組成?
組分 規(guī)格(96T) 保存條件
預(yù)包被抗LAMA3抗體微孔板 12×8條 2-8℃
重組LAMA3標(biāo)準(zhǔn)品 10ng/管×2管 -20℃凍存
生物素標(biāo)記檢測抗體 100μL(100×) 避光
親和素-HRP復(fù)合物 100μL(100×) 避光
TMB顯色液 A/B各10mL 2-8℃避光
20×洗滌緩沖液 20mL 室溫
注：具體配置以實際產(chǎn)品批號說明書為準(zhǔn)?。
三、樣本處理?
血清/血漿?：室溫靜置2h后離心(1000×g, 15min)，取上清檢測。
組織勻漿?：PBS沖洗后冰上研磨，超聲破碎后5000×g離心5min取上清。
細(xì)胞培養(yǎng)上清?：直接離心(1000×g, 10min)去除雜質(zhì)。
禁忌：溶血或反復(fù)凍融樣本需棄用?。
四、操作流程?
平衡?：試劑盒室溫平衡30min。
加樣?：標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各100μL，空白孔加稀釋液。
孵育?：37℃ 90min→洗滌3次(每次30s)。
顯色?：避光加入TMB，37℃ 15min→終止液終止。
檢測?：450nm測定OD值，600nm校正?。
五、注意事項?
移液精度?：使用校準(zhǔn)移液槍(誤差≤2%)，避免交叉污染?。
溫度控制?：試劑需平衡至室溫，禁止水浴加熱?。
避光操作?：TMB顯色全程避光，孵育時覆蓋酶標(biāo)板?。
批次一致性?：不同批次試劑不可混用?。
注：僅供科研使用，以上資料供參考，如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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