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以下是關于人I型前膠原氨基端肽(PINP)ELISA試劑盒的實驗使用說明，綜合整理自多個廠商的標準化操作流程和注意事項：
BS-1688人I型前膠原氨基端肽(PINP)ELISA試劑盒
一、檢測原理
采用雙抗體夾心法或競爭法ELISA技術，通過包被抗體捕獲樣本中的PINP抗原，經(jīng)酶標抗體結合后顯色，450nm波長測定OD值，濃度與吸光度呈正相關?。
二、試劑盒組成
預包被微孔板?：96孔或48孔規(guī)格，含抗PINP抗體?
標準品?：凍干粉或液體，濃度通常為0-200ng/mL?
檢測抗體?：HRP標記或生物素化抗體?
底物系統(tǒng)?：TMB溶液(A/B組分)及終止液?
洗滌緩沖液?：20×或30×濃縮液，需稀釋使用?
三、樣本處理
血清/血漿?：
采集后室溫靜置30分鐘，3000×g離心10-20分鐘?
避免溶血或脂血，-20℃保存時需分裝防凍融?
組織勻漿?：
按1:9比例加入PBS勻漿，5000×g離心取上清?
四、操作步驟
試劑準備?：
標準品復溶后梯度稀釋(如0-32ng/mL)?
洗滌液按1:20比例稀釋?
加樣孵育?：
每孔加入50μL標準品或樣本，37℃孵育60-90分鐘?
洗滌?：
手工洗板需加滿洗滌液靜置1分鐘，重復5次?
顯色?：
加入TMB底物避光反應15分鐘，終止后15分鐘內(nèi)讀數(shù)?
五、關鍵注意事項
溫度控制?：
所有試劑使用前需室溫平衡20分鐘?
孵育時需密封防蒸發(fā)?
干擾因素?：
避免反復凍融樣本，高劑量生物素治療需停藥8小時后采樣?
質(zhì)量控制?：
建議標準品和樣本做復孔，板內(nèi)變異系數(shù)應<10%?
六、結果計算
以標準品OD值繪制曲線(建議使用四參數(shù)擬合)?
樣本濃度=測定值×稀釋倍數(shù)(若說明書注明需乘以系數(shù))?
七、性能參數(shù)
靈敏度?：通常為0.04-6.4pg/mL?
回收率?：血清中平均為97-102%?
特異性?：不與類似膠原蛋白交叉反應?
注：以上資料僅供參考，具體不同品牌試劑盒可能存在差異，請以實際說明書為準?。
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