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以下是兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)室使用說(shuō)明綜合指南：
BS-4200 兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒 天津本生
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心法ELISA技術(shù)，通過(guò)包被抗兔EGF抗體捕獲樣本中的目標(biāo)蛋白，依次加入HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體和TMB底物顯色，顏色深度與EGF濃度呈正相關(guān)。
二、試劑盒組成
組分 96孔配置 48孔配置
預(yù)包被微孔板 1×96 1×48
標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉) 0.5ml×1 0.5ml×1
HRP標(biāo)記抗體 6ml 3ml
TMB顯色液 A/B液各6ml A/B液各3ml
20×洗滌緩沖液 25ml 15ml
終止液 6ml 3ml
三、樣本處理要求
血清/血漿?：采集后30分鐘內(nèi)2-8℃離心(1000×g,20分鐘)，-20℃保存避免反復(fù)凍融
組織勻漿?：按1:9比例加入PBS勻漿，5000×g離心5-10分鐘取上清
細(xì)胞上清?：1000×g離心20分鐘去除沉淀
四、標(biāo)準(zhǔn)品配制
加入1ml蒸餾水復(fù)溶凍干標(biāo)準(zhǔn)品，配成480pg/ml母液
倍比稀釋建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(建議濃度梯度：480/240/120/60/30/0 pg/ml)
五、檢測(cè)步驟
加樣?：標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各加100μl，37℃孵育120分鐘
洗滌?：1×洗滌液洗板4-6次，每次浸泡1-2分鐘
加酶標(biāo)抗體?：100μl/孔，37℃孵育60分鐘
顯色?：加TMB避光反應(yīng)10-20分鐘
終止?：加終止液后30分鐘內(nèi)450nm測(cè)OD值
六、注意事項(xiàng)
所有試劑使用前需平衡至室溫
避免溶血/脂血樣本影響結(jié)果
顯色液變藍(lán)即失效，不可使用
不同批次試劑不可混用
七、技術(shù)參數(shù)
檢測(cè)范圍：15-480 pg/mL
靈敏度：<15 pg/mL
板內(nèi)/板間變異系數(shù)：<10%
注：以上資料僅供參考，建議實(shí)驗(yàn)時(shí)設(shè)置復(fù)孔并同步制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。具體操作細(xì)節(jié)可能因品牌差異需參考對(duì)應(yīng)說(shuō)明書(shū)。
天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。
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