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兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
BS-4223 兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒
以下是天津本生?兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒?的標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)操作說明：
一、檢測原理?
采用?雙抗體夾心法?：
包被抗兔CRP抗體捕獲樣本中的CRP;
加入生物素化抗體形成復(fù)合物，再結(jié)合HRP標(biāo)記鏈霉親和素;
TMB顯色，OD450nm吸光度值與CRP濃度正相關(guān)。
二、試劑盒組成?
組分 保存條件 規(guī)格與備注
預(yù)包被微孔板 4℃干燥 96孔(可拆卸)
CRP標(biāo)準(zhǔn)品 -20℃(凍干粉) 濃度梯度：39-5000 ng/mL
HRP標(biāo)記檢測抗體 4℃避光 含辣根過氧化物酶
TMB顯色液A/B 4℃避光 現(xiàn)配現(xiàn)用
終止液 室溫 顯色終止
20×濃縮洗滌液 室溫 使用前稀釋
三、樣本處理?
血清/血漿?：
全血室溫靜置2小時(shí)或4℃過夜，離心(1000×g，20分鐘)取上清;
避免溶血或反復(fù)凍融。
組織勻漿?：
按重量比加入PBS勻漿，離心(3000 rpm，10分鐘)取上清。
細(xì)胞培養(yǎng)上清?：直接離心去除沉淀。
四、實(shí)驗(yàn)步驟?
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：
凍干標(biāo)準(zhǔn)品用稀釋液復(fù)溶，梯度稀釋為2500 ng/mL至39 ng/mL。
加樣與孵育?：
每孔加入50μL樣本或標(biāo)準(zhǔn)品，37℃孵育30分鐘;
洗滌5次(手動(dòng)或自動(dòng)洗板機(jī))。
顯色與檢測?：
加入TMB顯色液(A/B各50μL)，避光反應(yīng)15分鐘;
加終止液50μL，立即450nm測OD值。
五、數(shù)據(jù)分析?
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線;
樣本濃度=曲線對應(yīng)值×稀釋倍數(shù)。
六、注意事項(xiàng)?
質(zhì)量控制?：
空白孔OD值應(yīng)<0.1，板內(nèi)變異系數(shù)<10%;
避免NaN3污染(抑制HRP活性)。
保存條件?：
未開封試劑盒2-8℃保存6個(gè)月，開封后盡快使用。
七、常見問題?
邊緣效應(yīng)?：溫育時(shí)使用水浴或預(yù)熱板/試劑至37℃以消除;
無信號(hào)?：檢查酶標(biāo)抗體活性及洗滌是否。
BS-4223兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 天津本生
注：以上資料僅供參考，不作為實(shí)際應(yīng)用。如需具體品牌試劑盒的差異操作(如本生、天正信達(dá)等)，建議參考對應(yīng)說明書。
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