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以下是雞β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明書(shū)核心內(nèi)容整理：
BS-4389 雞β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒
一、檢測(cè)原理
采用雙抗體夾心法，通過(guò)預(yù)包被的雞IFN-β抗體捕獲樣本中的目標(biāo)蛋白，再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合形成復(fù)合物，經(jīng)TMB顯色系統(tǒng)反應(yīng)后，450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值，顏色深度與IFN-β濃度成正比。
二、試劑盒組成
預(yù)包被微孔板?：96孔或48孔規(guī)格(抗雞IFN-β抗體包被)
標(biāo)準(zhǔn)品?：6濃度梯度(常見(jiàn)范圍：25-800pg/mL或15.625-1000pg/mL)
酶標(biāo)抗體?：HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體
顯色系統(tǒng)?：TMB底物A/B液
終止液?：2M硫酸溶液
濃縮洗滌液?：20×或30×需稀釋使用
三、樣本處理要求
血清/血漿?：3000rpm離心10-30分鐘，避免溶血
細(xì)胞培養(yǎng)上清?：直接離心去除顆粒物
組織勻漿?：按重量比加入PBS勻漿后離心取上清
保存條件?：-20℃分裝，避免反復(fù)凍融
四、操作步驟
平衡試劑?：所有組分室溫平衡20-30分鐘
加樣?：標(biāo)準(zhǔn)品/樣本按50-100μL/孔加入
孵育?：37℃反應(yīng)30-60分鐘，洗滌3-5次
顯色?：加入TMB避光反應(yīng)10-15分鐘
終止與檢測(cè)?：加終止液后立即測(cè)定450nm OD值
五、關(guān)鍵參數(shù)
檢測(cè)范圍?：2-48ng/L或15.625-1000pg/mL(不同品牌有差異)
靈敏度?：檢測(cè)限5.7pg/mL
精密度?：板內(nèi)/板間變異系數(shù)<10%
有效期?：6-12個(gè)月(2-8℃保存)
六、注意事項(xiàng)
不同批次試劑不可混用
顯色時(shí)間需嚴(yán)格控制，強(qiáng)光會(huì)干擾結(jié)果
加樣需保持速度一致，避免孔間時(shí)間差過(guò)大
酶標(biāo)板開(kāi)封后需密封防潮保存
完整操作請(qǐng)以試劑盒內(nèi)附說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)，部分品牌提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。
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