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大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)的含量，采用雙抗體夾心法進(jìn)行測定。?
實(shí)驗(yàn)原理?
本試劑盒通過雙抗體夾心法來測定標(biāo)本中的大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)水平。首先用純化的大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)抗體包被微孔板，制成固相抗體。然后往包被單抗的微孔中依次加入糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)，再與HRP標(biāo)記的糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色，TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺與樣品中的糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)呈正相關(guān)，可以通過酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，并利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)的濃度?。
試劑盒組成?
試劑盒包括：
微孔板
標(biāo)準(zhǔn)品
酶標(biāo)試劑
樣品稀釋液
顯色劑A液和B液
終止液
濃縮洗滌液等?
操作步驟?
樣本處理?：根據(jù)樣本類型(如血清、血漿等)進(jìn)行相應(yīng)的處理，如離心以去除顆粒和聚合物。
加樣?：將標(biāo)準(zhǔn)品和樣品加入微孔板中，每個樣品設(shè)置復(fù)孔以提高準(zhǔn)確性。
溫育和洗滌?：將微孔板密封后置于37℃下溫育30分鐘，然后進(jìn)行洗滌以去除未結(jié)合的物質(zhì)。
顯色和測定?：加入顯色劑后觀察顏色變化，并在酶標(biāo)儀上測定各孔的吸光度(OD值)。
數(shù)據(jù)分析?：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)的濃度?。
注意事項(xiàng)?
試劑保存?：試劑應(yīng)在2-8℃下保存，避免反復(fù)冷凍。
操作建議?：避免細(xì)胞刺激和熱源污染，使用無熱原和內(nèi)毒素的試管收集血液樣本。
安全防護(hù)?：實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)避免直接接觸終止液和底物A、B，以免對皮膚造成傷害?。
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